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分享干细胞培养传统方法

436 人阅读发布时间:2018-10-29 09:59

    人类干细胞通常是在一层饲养细胞上培养的,据认为,这可为细胞提供必需的营养物质,并有助于防止细胞分化。*近,一项新的研究对这种根深蒂固的做法提出了挑战。
     众所周知,干细胞是很难维持和培养。像所有的真核细胞一样,它们对养分的有效性、pH值、温度、氧气和二氧化碳的含量都很敏感,而且它们也易于分化,留给研究人员的细胞不同于他们打算在实验中使用的细胞。

    在早期,研究人员发现,在小鼠胚胎成纤维细胞层的顶部培养干细胞,可阻碍分化并有助于维持干细胞的健康。但是MEF特别不容易维持自我。从那时起,研究人员和生物技术公司已经开发出其他有效的饲养层细胞系,可提供干细胞培养方面的优势,以及与干细胞之间更有利的相互作用,无饲养细胞的方法也已经变得可用。

    一项新研究,对长期持有的观念——饲养细胞为干细胞生长提供必要的营养物质并防止细胞分化,提出了一些质疑。为了调查饲养层细胞在干细胞培养中的作用,研究小组根据标准培养程序需要,首次制备了人真皮成纤维细胞培养物,但是在添加干细胞之前,他们用甲醛固定成纤维细胞。这会使细胞层的拓扑结构稳定,但会杀死细胞。去除固定剂之后,他们把人类诱导多能干细胞分层堆放在死亡的饲养层细胞上。

      他们发现,hiPSC不仅粘附并生长为健康的培养集落,而且它们也持续表达多能性标志,从而表明分化也被阻断。这些细胞也在体内形成具有所有三个胚层的畸胎瘤,这是干细胞的一个定义性特征。

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