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    上海

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转基因元件tml3终止子LAMP试剂盒R实验步骤:

148 人阅读发布时间:2021-03-18 15:28

转基因元件tml3终止子LAMP试剂盒R实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
使用方法:
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DN段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA试剂盒    human hepatitis B virus,HBV preS2Ag ELISA Kit
人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA试剂盒    human hepatitis B virus,HBV preS2Ag ELISA Kit
人乙型肝炎病毒前S2抗体(HBV preS2Ab)ELISA试剂盒    human hepatitis B virus,HBV preS2Ab ELISA Kit
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人乙型肝炎病毒核心抗体IgM(HBcAb-IgM)ELISA试剂盒    Human anti-hepatitis B virus core antibody IgM,HBcAb-IgM ELISA Kit
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人乙型肝炎病毒核心抗体IgG(HBcAb-IgG)ELISA试剂盒    Human anti-hepatitis B virus core antibody IgG,HBcAb-IgG ELISA Kit
人乙型肝炎病毒核心抗体IgG(HBcAb-IgG)ELISA试剂盒    Human anti-hepatitis B virus core antibody IgG,HBcAb-IgG ELISA Kit
人乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)ELISA试剂盒    Human anti-hepatitis B virus core antibody,HBcAb ELISA Kit
人乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)ELISA试剂盒    Human anti-hepatitis B virus core antibody,HBcAb ELISA Kit
人乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)ELISA试剂盒    Human anti-hepatitis B virus surface antibody,HBsAb ELISA Kit
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