钾离子通道蛋白家族成员4抗体抗体分子标记技术简述

钾离子通道蛋白家族成员4抗体抗体分子标记技术：
(-)原理
当应用化学氧化法时碘化钠Nal)遇强氧化剂碘离子被氧化为碘分子,所生成的自由碘分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行鹵化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨残基也可能进行碘化。在应用氯胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化(1,3,4,6-tetrachloro-3a,6 sadipheny l-glucolurils挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后先让其挥发即让氧化剂将试管包被}然后把Na125和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1,试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5m이/L磷酸钠冲液,pH7.5;无载体的Na12513.7GBq/m(100mc/ml)的NaOH液;100g/L三lu醋酸;70%乙醇;新鮮制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠簧冲液pH7.5);氯胺T反应终止冲液。

2.仪器
胶过滤柱;￥-记数器;玻璃纤维。
(三)操作要点
1.用氯胺T法进行碘化也可在大约pH7.0的簧冲液中进行
2如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FTC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml
3. lodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年。
4.1251标记的抗体在制备后六周内均可使用1251的半衰期为59.6天。
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的陈日制剂的比活性低。
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干抗,因此降低其结合能力,但这种情況很少。
酸性磷酸酶样蛋白2抗体
AHNAK核蛋白2抗体
二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗体
p53诱导蛋白5抗体
锚蛋白重复域5抗体
脑钠通道蛋白2抗体
脑钠通道蛋白4抗体
小肠钠通道蛋白5抗体
APXL蛋白抗体
酸敏感离子通道蛋白3抗体
天门冬氨酸β羟化酶抗体
精氨酸加压素受体2抗体
细胞骨架肌动蛋白样蛋白3抗体
膜粘连蛋白8抗体
水通道蛋白8抗体
锚蛋白重复结构域蛋白40抗体
凋亡抑制因子5抗体
水通道蛋白-3抗体
载脂蛋白D抗体
丁酰基辅酶A合成酶3抗体
脂肪细胞源性亮氨酸氨基肽酶抗体
线粒体凋亡诱导因子2抗体
ABL2蛋白抗体
血管紧张素转换酶ACE1抗体
血管紧张素转换酶2抗体
Acinus抗体
醋酸激酶1抗体