红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白实验测定具体步骤

红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白实验测定具体步骤：

1．确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目，并增加 1 孔作为 TMB 空白显色孔。 总数=样品数+9；做双份检测时×2。其余重包装好放如冰箱中。 

2．将标准品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1 孔只加样品稀释液的作为零孔。对于血清、体液、 组织匀浆或细胞培养上清，直接加已用样品稀释液稀释的样品 100μ ι 。 

3．酶标板加上盖，37℃反应 90 分钟。 

4．反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体；或甩去酶标板内液体，再对着吸水纸拍几下。 不洗。 

5．将准备好的生物素抗体工作液按每孔 0.1ml 依次加入。（TMB 空白显色孔除 外）。37℃反应 60 分钟。 

6． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 3 次，每次浸泡 1 分钟左右。 

7．将准备好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入（TMB 空白显色孔除外）。37℃反应 30 分钟。 

8． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 5 次，每次浸泡 1-2 分钟左右。 

9．按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分钟的 TMB 显色液，37℃避光反应 20-25 分钟 （注意：显色时间供参考，因用户实验室条件差异，显色时间会有所不同。此时肉眼可 见标准品的前 3-4 孔有明显的梯度蓝色，后 3-4 孔差别不明显）。 

10．按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 终止液，此时蓝色立转黄色。 

11．用酶标仪在 450nm 测定 O.D.值。
芳香化酶/细胞色素P450/雌激素合成酶抗体
腺苷A2A受体抗体
蛋白激酶A锚定蛋白95抗体
顶膜钠依赖性胆盐转运体蛋白抗体
去整合素样金属蛋白酶8抗体
芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体
ACN9蛋白抗体
双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体（N端）
腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体
腺苷酸激酶抗体
α2巨球蛋白样蛋白1抗体 α2ML1
细胞凋亡相关蛋白3抗体
肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体
ATP结合蛋白家族7抗体
ASCL2蛋白抗体
磷酸化脊髓小脑失调症蛋白1抗体
磷酸化活化转录因子1抗体
磷酸化活化复制因子2抗体
磷酸化活化复制因子2抗体
磷酸化活化复制因子2抗体
磷酸化活化复制因子2抗体
磷酸化活化复制因子2抗体
磷酸化活化复制因子2抗体
活化转录因子5抗体
活化转录因子6β抗体
AICAR甲酰基转移酶抗体
磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
ATP5E蛋白抗体
ATP5G2蛋白抗体
ATP6V0D2蛋白抗体