倍赞氏金蝇探针法荧光定量PCR试剂盒反应五要素

倍赞氏金蝇探针法荧光定量PCR试剂盒反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白1抗体
共济失调性眼球运动功能丧失相关蛋白AOA1抗体
三号染色体开放阅读框抗体
腺嘌呤磷酸核糖转移酶抗体
磷酸化水通道蛋白2抗体
ADP核糖基化因子1抗体
乙型肝炎病毒X相关蛋白2抗体
ADP核糖基化因子5抗体
ADP核糖基化因子结合蛋白抗体
ADP核糖基化因子GTP酶激活蛋白1抗体
ADP核糖基化因子相关蛋白1
琥珀酸裂解酶抗体
精氨酰tRNA合成酶抗体
真核翻译起始因子2C3抗体
真核翻译起始因子2C4抗体
Rho GTP酶激活蛋白15抗体
抑癌基因结合蛋白ARID1B抗体
E3连接酶蛋白ARIH2抗体
ADP核糖基化样因子1抗体
ADP核糖基化因子样蛋白4抗体
肌动蛋白相关蛋白2/3抗体
肌动蛋白相关蛋白2/3亚型2抗体
肌动蛋白相关蛋白2/3亚型4抗体
芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗体
肿瘤抑制相关蛋白PHEMX抗体
精神分裂症与犰狳重复基因抗体