蛋白酶抑制剂混合物(用于哺乳动物)实验步骤

蛋白酶抑制剂混合物(用于哺乳动物)实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glu)ELISA Kit，48T/96T 
人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA Kit，48T/96T
小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)
大鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)
人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA Kit，48T/96T 
小鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA Kit，48T/96T 
大鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA Kit，48T/96T 
人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(CCL11)ELISA Kit，48T/96T 
小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(CCL11)ELISA Kit，48T/96T
大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(CCL11)ELISA Kit，48T/96T
人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA Kit，48T/96T 
小鼠红细胞生成素受体(EPOR)ELISA Kit，48T/96T 
大鼠红细胞生成素受体(EPOR)ELISA Kit，48T/96T 
人红细胞生成素(EPO)ELISA Kit，48T/96T 
小鼠红细胞生成素(EPO)ELISA Kit，48T/96T 
大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA Kit，48T/96T 
人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit，48T/96T 
小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit，48T/96T 
猴E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit，48T/96T 
大鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit，48T/96T 
兔子E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit，48T/96T