Bcl-2 elisa酶联免疫试剂盒操作步骤

Bcl-2 elisa酶联免疫试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。
肠出血性大肠杆菌埃希氏菌O157:H7抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶ERK抗体
CD312抗体
eIF4E结合蛋白抗体
磷酸化表皮生长因子受体抗体
磷酸化表皮生长因子受体抗体
肝配蛋白A1受体抗体
真核翻译起始因子2C2抗体
眼睛发育缺失蛋白EYA2抗体
EYA4蛋白抗体
血清反应因子辅助蛋白1抗体
吞噬细胞运动蛋白2抗体
红细胞膜条带4.1蛋白抗体
磷酸化红细胞生成素受体抗体
转录调节因子E2F7抗体
胶质细胞谷氨酸运载蛋白4抗体
erbB3结合蛋白1抗体
烯酰辅酶A水合酶1抗体
烯酰辅酶A水合酶含结构域蛋白2抗体
肿瘤坏死因子受体超家族成员EDAR抗体
自身抗原抗体EDC4抗体
E3泛素蛋白连接酶EDD抗体
胚胎外胚层发育蛋白EED抗体
转录接头蛋白EP300抗体