停乳链球菌探针法荧光定量PCR试剂盒RNA质量检测:
1)紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
浓度测定
A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。具体计算如下:
RNA溶于40 l DEPC水中,取5ul,1:100稀释至495的TE中,测得A260 = 0.21
RNA 浓度= 0.21 ×100 ×40 g/ml = 840 g/ml 或 0.84 g
取5ul用来测量以后,剩余样品RNA为35 l,剩余RNA总量为:
35 l × 0.84 gl = 29.4 g
②纯度检测
RNA溶液的A260/A280的比值即为RNA纯度,比值范围1.8到2.1。
2)变性琼脂糖凝胶电泳测定
①制胶
1g琼脂糖溶于72ml水中,冷却至60℃,10 ml的10× MOPS电泳缓冲液和18 ml的37% 甲醛rong液(12.3 M)。
10×MOPS电泳缓冲液
浓度 成分
0.4M MOPS,pH 7.0
0.1M 乙酸钠
0.01M EDTA
灌制凝胶板,预留加样孔至少可以加入25 l溶液。胶凝后取下梳子,将凝胶板放入电泳槽内,加足量的1×MOPS电泳缓冲液至覆盖胶面几个毫米。
亮氨酰氨基肽酶(LAP)重组蛋白
淋巴细胞功能关联抗原3(LFA3)重组蛋白
磷酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)重组蛋白
磷脂酶A1(PLA1)重组蛋白
磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)重组蛋白
磷脂爬行酶2(PLSCR2)重组蛋白
磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)重组蛋白
磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)重组蛋白
鳞状细胞癌抗原2(SCCA2)重组蛋白
硫酸肝素蛋白聚糖(HSPG)重组蛋白
硫酸皮肤素差向异构酶(DSE)重组蛋白
硫氧化还原蛋白(Trx)重组蛋白
硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)重组蛋白
硫氧还蛋白结合蛋白2(TBP2)重组蛋白
瘤变抑制因子14(ST14)重组蛋白
卵巢肿瘤蛋白1(OTUB1)重组蛋白
卵泡抑素(FS)重组蛋白
免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)重组蛋白
膜辅蛋白(MCP)重组蛋白
内分泌腺来源血管内皮生长因子(EG-VEGF)重组蛋白
内凝集蛋白1(ITLN1)重组蛋白
内皮素1(EDN1)重组蛋白