大鼠内脂素/内脏脂肪素elisa检测试剂盒试剂配制

大鼠内脂素/内脏脂肪素elisa检测试剂盒试剂配制
　　1、 标准品
　　(1) 从试剂盒中取出一支标准品，于6000-10000rpm 离心30 秒。用1ml 样本稀释液溶解，并用吸头对准冻存管底部反复吸打5 次以助溶解，充分混匀得到标准品S7，放置备用。
　　(2) 取7 个1.5 ml 离心管(S0-S6)依次排列，各加入250μl 样本稀释液。吸取250μl 标准品S7 到*个离心管中(S6)，轻轻吹打混匀。从S6 中吸取250μl 到第二个EP 管中(S5)，轻轻吹打混匀。以此类推进行标准品的倍比稀释。S0 为样本稀释液。
　　2、 洗液工作液浓洗涤液按1:25倍用去离子水进行稀释。例如用量筒量取240ml去离子水，倒入烧杯或其他洁净容器中，再量取10ml浓洗涤液，均匀加入，搅拌混匀，在临用前配妥。浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
　　3、 生物素标记抗体工作液生物素标记抗体液按1:100倍用生物素标记抗体稀释液进行稀释。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液，轻轻混匀，在临用前10分钟内配妥。
　　4、 辣根过氧化物酶标记亲和素工作液辣根过氧化物酶标记亲和素按1:100倍用辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液进行稀释。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液，轻轻混匀，在临用前10分钟内配妥。
洗涤方法：
1. 自动洗板机：每孔加入洗涤液350μl，注入与吸出间隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板：甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350μl，浸泡1-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。