猪ANG-2检测加样环节有哪些常见错误

猪ANG-2检测加样环节的常见错误，核心集中在6大类，是引发结果偏差的高频人为诱因：

孔位类错误
无提前绘制的标准化加样排布图，凭记忆加样，出现孔位加错、样本编号与孔位不匹配的问题
跳孔无序加样，中途被打断后无法追溯已加孔位，直接出现漏加、重复加样的情况
加样量类错误
移液枪未定期校准精度，吸液时枪头浸入液面过深/过浅，加样量偏差超过允许范围
加样时移液器倾斜角度过大，吸液量不一致，部分孔实际加样量远低于设定值
样本稀释比例计算错误，如要求1:10稀释时，实际加入90μL稀释液+20μL样本，导致实际抗原浓度与预期严重偏离
交叉污染类错误
不同样本、不同浓度标准品之间不更换枪头，用加过样本的吸头直接吸取标准品，造成试剂交叉污染
枪头触碰孔底包被层，破坏预先包被的捕获抗体，同时将孔内残留的反应液带到其他孔，引发孔间交叉污染
试剂混淆类错误
误将样本稀释液当成样本加入，或混淆标准品不同梯度的浓度顺序，导致标准曲线完全失真
浓缩试剂未按要求提前稀释，直接将高浓度母液加入孔内，破坏整个反应体系的浓度平衡
操作顺序类错误
加样顺序混乱，先加样本后加标准品，整板加样耗时远超10分钟，前后孔反应起始时间差过大
加样完成后未及时封板，部分孔液体提前蒸发，局部试剂浓度异常升高
样本处理类错误
溶血、严重污染的样本未提前剔除就直接上样，引入大量杂蛋白干扰反应，直接拉高本底OD值
样本稀释后未充分涡旋混匀，直接取部分液体加样，孔内实际抗原浓度分布不均，结果重复性极差