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哈达尔沙门氏菌PCR检测试剂盒使用操作流程

272 人阅读发布时间:2020-10-22 16:36

哈达尔沙门氏菌PCR检测试剂盒操作流程
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测
注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个专用的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
骆驼源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒
骆驼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
马源性成分LAMP试剂盒
马源性成分PCR检测试剂盒
马源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒
马源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
猫源性成分LAMP试剂盒
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牦牛源性成分LAMP试剂盒
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牦牛源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒
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绵羊源性成分LAMP试剂盒
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