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人神经丝蛋白(NF)免疫组化试剂盒洗涤方法

287 人阅读发布时间:2021-11-11 16:13

人神经丝蛋白(NF)免疫组化试剂盒洗涤方法:
1. 自动洗板机:每孔加入洗涤液350μl,注入与吸出间隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350μl,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。
实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。
3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。
5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。
7.每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。
ABCF1    ATP结合盒蛋白家族GCN20F家族1抗体
AKR1B1    醛糖还原酶抗体
Serum albumin    人血清白蛋白抗体
Anthrax    炭疽菌抗体(采用活疫苗制备)
ATF4    活化转录因子4抗体
Adenylate Kinase 1    腺苷酸激酶-1抗体
F-Actin    纤维状肌动蛋白抗体
Agrin    聚集蛋白抗体
AIF    调亡诱导因子抗体
AIF    调亡诱导因子抗体
ALK    间变型淋巴瘤激酶抗体
AMACR    α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗体
Annexin A1    膜粘连蛋白A1抗体
ATG1/ULK1    自噬相关蛋白1抗体
beta Amyloid 1-16    β淀粉样肽1-16/Aβ1-16 抗体
APCDD1    腺瘤性息肉调节蛋白抗体
APPL1    衔接因子蛋白含pH域蛋白1抗体
AQP7    水通道蛋白-7抗体
ALT1/Alanine Transaminase    谷丙氨酸氨基转移酶1抗体
ARHG7    p21活化蛋白激酶ARHG7抗体
phospho-APE(Ser1417)    磷酸化肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体
Angiotensin II Type 1 Receptor    血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体
ADORA2B    腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体
ADAM19    去整合素样金属蛋白酶19抗体
 

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