粪产碱杆菌探针法荧光PCR检测试剂盒实验过程

粪产碱杆菌探针法荧光PCR检测试剂盒实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
phospho-arfaptin 2 (Ser260)    磷酸化ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体
Phospho-Aurora B (Thr232) + Aurora C (Thr198)    磷酸化有丝分裂激酶B/C抗体
phospho-Acinus (Ser1180)    磷酸化腺泡Acinus蛋白抗体
APS    APS抗体
ACVRL1    激活素受体样激酶1抗体
ACVR1B    激活素A受体1B抗体
phospho-Androgen Receptor (Ser597)    磷酸化雄激素受体抗体
phospho-A Raf (Ser214)    磷酸化A-Raf抗体
ASAH2    酰基鞘氨醇脱酰酶2抗体
ASAM    脂肪细胞特异性粘附分子抗体
AAV5 capsid VP2 protein    腺相关病毒5抗体
AMPK gamma 3    腺苷酸活化蛋白激酶γ3抗体
AMPK beta 2    腺苷单磷酸活化蛋白激酶β2抗体
phospho-APC1 (Ser355)    磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体
ANAPC1    细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体
phospho-AKT2 (Ser474)    磷酸化蛋白激酶B2抗体
phospho-APBB1 (Ser175)    磷酸化铁蛋白Fe65抗体
phospho-APBB1 (Ser347)    磷酸化铁蛋白Fe65抗体
phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743)    磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体